文献类型： 中文期刊
作者： 袁秀芳 1 ; 路斌 2 ; 徐丽华 1 ; 李军星 1 ; 王一成 1 ;
作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
2.海盐县畜牧兽医局
关键词： 猪瘟病毒;猪繁殖与呼吸综合征病毒;双重实时荧光定量RT-PCR
期刊名称： 浙江农业学报
ISSN： 1004-1524
年卷期： 2015 年 27 卷 04 期
页码： 537-543
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 根据猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,分别设计了1对特异性引物和1条Taq Man探针,建立了一步法检测CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法特异性高,与PCV2,PRV,PPV,PEDV,JEV,BVDV无交叉反应;可以检出20个拷贝数的模板RNA,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)低于4%,方法重复性好。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对50份疑似病例组织进行检测,结果荧光定量RT-PCR检出30份PRRSV阳性,13份CSFV阳性,均高于常规RT-PCR方法的检出数(24份PRRSV阳性,10份CSFV阳性)。本研究建立的双重实时荧光定量RT-PCR方法具有快速、特异性好、灵敏度高的特点,可用于PRRSV和CSFV的实验室快速诊断和流行病学调查。
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