文献类型： 中文期刊
作者： 杨相昆 1 ; 田海燕 2 ; 牛建新 1 ; 王林 1 ; 代永欣 1 ;
作者机构： 1.石河子大学农学院园艺系
2.新疆兵团绿洲生态农业重点实验室
关键词： 葡萄病毒B;检测;重组质粒;序列;同源性
期刊名称： 生物技术通报
ISSN： 1002-5464
年卷期： 2010 年 0 卷 05 期
页码： 97-100+106
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 旨在建立适合葡萄的葡萄病毒B的RT-PCR检测技术。从感染葡萄病毒B的葡萄皮层中提取总RNA,以其为模板合成cDNA第一链,并利用两对引物分别进行PCR扩增;回收PCR特异扩增产物,与pUCm-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。结果显示,两对引物均能获得与预期片段大小一致长约460 bp和470 bp的扩增产物扩增片段序列与已报道GVB序列(序列号:X75448)的核苷酸同源性均为81%,经反复多次试验证实,利用总RNA为模板合成cDNA并进行PCR扩增检测GVB是准确、可靠的。
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