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发根农杆菌介导的细茎柱花草毛状根转化体系的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 赵兴坤 1 ; 孙昊 1 ; 杨丽云 1 ; 罗丽娟 1 ; 刘攀道 2 ;

作者机构: 1.海南大学热带作物学院

2.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室

关键词: 细茎柱花草;子叶节;发根农杆菌;转基因;毛状根

期刊名称: 草地学报

ISSN: 1007-0435

年卷期: 2023 年 002 期

页码: 581-586

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 细茎柱花草(Stylosanthes gracilis)是圭亚那柱花草(S.guianensis)的野生近缘种,具有茎秆直立、种子落粒性低、抗旱能力较强等特点。为开发一种高效的细茎柱花草毛状根转化体系,本研究以细茎柱花草子叶节为外植体及4个发根农杆菌为供试菌种,探索菌液浓度、侵染时间、共培养时间对毛状根转化效率的影响。结果表明MSU440为诱导毛状根发生的最优菌株,诱导率为88.3%。其中,该菌株诱导毛状根产生的最佳条件为菌液浓度OD600=0.3、侵染时间为15 min、共培养4 d,转化效率达34.72%。同时,获得的转基因材料通过聚合酶链式反应(PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)分子鉴定方式,证实了外源基因已整合到细茎柱花草毛状根的基因组中。因此,本研究成功建立了一种细茎柱花草的毛状根转基因体系。

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