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多肉植物红心莲茎腐病尖孢镰刀菌LAMP快速检测技术的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 姚锦爱 1 ; 黄鹏 1 ; 陈汉鑫 2 ; 侯翔宇 1 ; 余德亿 1 ;

作者机构： 1.福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省农业科学院植物保护研究所

2.漳州市农业科学研究所

关键词： 红心莲;茎腐病;尖孢镰刀菌;环介导等温核酸扩增技术(LAMP);检测

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2020 年 008 期

页码： 863-868

收录情况： CSCD

摘要： [目的]建立一种景天科多肉植物红心莲茎腐病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)快速、简便、灵敏的LAMP可视化检测方法,在茎腐病发生初期实现病原菌的快速准确检测,为病害的早期监测、诊断及防治提供依据.[方法]以EF-1a(Elongation factor-1α)基因序列为靶序列,设计LAMP(Loopmediated isothermal amplification)特异性引物;以红心莲尖孢镰刀菌DNA为模板,优化反应温度和反应时间,建立LAMP检测反应体系,开展特异性和灵敏度验证及田间病株检测.[结果]建立的LAMP反应体系可有效检测出多肉植物红心莲茎腐病尖孢镰刀菌,最佳反应温度、反应时间分别为65℃,60 min;特异性验证表明红心莲尖孢镰刀菌DNA呈绿色阳性反应,灵敏度验证表明LAMP检测最小质量浓度是10 fg·μL-1,比常规PCR提高了10倍;采用LAMP法对15份疑似红心莲茎腐病田间样本进行快速检测,检出率为100%.[结论]本研究建立的多肉植物红心莲茎腐病菌LAMP快速检测方法不仅特异性强、灵敏度高,而且检测结果可视、假阳性低,适合田间尖孢镰刀菌引起的红心莲茎腐病的快速检测.

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