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电穿孔法转染猪胎儿成纤维细胞条件优化

文献类型: 中文期刊

作者: 张庆晓 1 ; 王慧利 1 ; 孟春花 1 ; 王锋 2 ; 曹少先 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室

2.南京农业大学动物科技学院

关键词: 猪;胎儿成纤维细胞;电穿孔;转染;效率;增强型绿色荧光蛋白

期刊名称: 江苏农业科学

ISSN: 1002-1302

年卷期: 2012 年 40 卷 12 期

页码: 214-216

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,采用L9(33)正交试验设计,对质粒浓度、电压、脉冲时间等3个因素进行优化,并比较了不同温度处理对转染效率的影响,以及电压对细胞存活率的影响。结果表明,3个因素中质粒浓度对转染效率的影响最大,质粒浓度和电压对转染效率均有显著影响,脉冲时间对转染效率的影响不显著。不同温度处理下的转染效率无显著差异,电压显著影响细胞存活率。质粒浓度40 g/mL、电压280 V、脉冲时间800 s条件下,转染效率最高,为89.8%。

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