文献类型： 中文期刊

作者： 韩平安 ¹ ; 孙瑞芬 ¹ ; 常悦 ¹ ; 唐宽刚 ¹ ; 王良 ¹ ; 聂利珍 ¹ ; 张自强 ¹ ; 梁亚晖 ¹ ; 吴新荣 ¹ ; 李晓东 ¹ ;

作者机构： 1.内蒙古自治区农牧业科学院

关键词： 烟草;CENH3基因;CRISPR/Cas9;转基因;基因组编辑

期刊名称： 北方农业学报

ISSN： 2096-1197

年卷期： 2022 年 50 卷 003 期

页码： 1-8

摘要： [目的]通过CRISPR/Cas9技术对烟草CENH3基因进行编辑,获得CENH3基因发生突变的植株,确定编辑载体的编辑效率与突变类型,建立高效基因组编辑技术体系.[方法]根据CENH3序列设计特异性编辑位点,构建CENH3编辑载体;采用农杆菌介导法转化烟草获得转基因植株,通过测序明确转基因植株的目标基因编辑效率与CENH3突变类型;利用微滴式数字PCR技术筛选低拷贝突变体植株.[结果]随机检测的11株转基因烟草植株,有6株被编辑,编辑效率为54.5%;编辑植株中,靶标1未发生突变,靶标2发生4种突变类型.6株编辑植株均为低拷贝植株,拷贝数为0.3~1.2.[结论]实现了对烟草CENH3的定点编辑,建立了CRISPR/Cas9介导的烟草CENH3基因组编辑体系.