文献类型: 中文期刊
作者: 李伟 1 ; 陈松林 2 ;
作者机构: 1.中国海洋大学海洋生命学院
2.中国水产科学研究院黄海水产研究所
关键词: 牙鲆;抗菌肽;HEPCIDIN;大肠杆菌;表达;活性
期刊名称: 高技术通讯
ISSN: 1002-0470
年卷期: 2007 年 17 卷 007 期
页码: 765-770
收录情况: EI ; 北大核心 ; CSCD
摘要: 根据从实验室克隆的牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因(GENBANK登陆号DQ129693)的序列,设计了特异性引物,PCR扩增其成熟肽片段.重组至融合表达载体PGEX-4T-1中,构建成牙鲆抗菌肽HEPCIDIN基因融合表达载体PGEX-FHEP,转化至大肠杆菌BL21(DE3)PLYS中,筛选得到的阳性克隆用IPTG进行诱导.SDS-PAGE电泳显示在29KD处有特异性的蛋白条带出现,WESTERN-BLOTTING 检测表明已经成功表达了融合蛋白,表达的融合蛋白最高占总蛋白的21%.纯化得到的GST-FHEP用凝血酶切割后,用亲合层析得到牙鲆的抗菌肽HEPCIDIN.抑菌实验结果表明抗菌肽对大肠杆菌(ATCC25922)有一定程度的抑制作用.
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