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橡胶树红根病病原菌LAMP检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 贺春萍 1 ; 董文敏 2 ; 吴伟怀 1 ; 梁艳琼 1 ; 李锐 1 ; 谢立 3 ; 黄兴 1 ; 易克贤 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室

2.南京农业大学植物保护学院

3.海南大学林学院

关键词: 灵芝菌;环介导等温扩增;分子检测

期刊名称: 热带作物学报

ISSN:

年卷期: 2021 年 001 期

页码: 182-187

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 由灵芝菌(Ganodermapseudoferreum)引起的红根病是橡胶上危害面积最广、影响最大的世界性根部传染性病害。本研究利用环介导等温扩增技术(LAMP),以G. pseudoferreum线粒体Large rDNA特异片段为靶标序列,设计出G.pseudoferreum特异性LAMP引物,以SYBRGreenI为指示剂,建立基于颜色判断的直观、快速、灵敏的G.pseudoferreum LAMP检测方法,优化了反应体系和条件,进行了特异性、灵敏度及田间疑似病样的检测验证。结果表明:整个试验检测时间仅需80 min,在等温64℃条件下反应1 h能特异性检测出G. pseudoferreum;特异性检测中,G.pseudoferreum菌株扩增后呈阳性(绿色),而其他真菌均为阴性(橙色)。该技术最低检测限为1×10-5 ng/μL。田间疑似病样LAMP体系检测,病原检出率为85%。本研究建立的LAMP检测技术为橡胶树红根病菌的快速鉴定提供了新技术。

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