文献类型： 中文期刊

作者： 李子璇 ¹ ; 韦莉 ² ; 王菁 ² ; 朱姗姗 ² ; 张春燕 ² ; 柳舒航 ² ; 全荣 ² ; 阎旭 ² ; 陈武 ¹ ;

作者机构： 1.北京农学院动物科学技术学院

2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

关键词： 禽偏肺病毒核衣壳N蛋白;哺乳动物细胞表达系统;显微镜观察;Western blotting

期刊名称： 北京农学院学报

ISSN： 1002-3186

年卷期： 2014 年 29 卷 04 期

页码： 49-53

摘要： 利用哺乳动物细胞表达系统对禽偏肺病毒C型核衣壳N蛋白进行表达,并检测所表达融合蛋白的抗原性。首先将N基因克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,构建重组真核表达载体,然后将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,通过倒置荧光显微镜和共聚焦显微镜检测N蛋白的表达,并用Western blot检测表达蛋白的抗原性。结果显示,禽偏肺病毒核衣壳N蛋白主要表达在细胞浆中,在转染后48h后表达量最高;与抗N蛋白抗体有抗原性,所表达核衣壳N融合蛋白大小为72kDa左右,与预期结果一致。结论,本试验成功应用哺乳动物表达系统表达了禽偏肺病毒C型核衣壳N蛋白,表达蛋白具有抗原性,为与禽偏肺病毒核衣壳N蛋白的相关研究奠定了基础。