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实时荧光定量PCR检测荔枝果皮中基因表达方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 魏永赞 1 ; 胡福初 2 ; 秦永华 3 ; 王惠聪 4 ; 胡桂兵 4 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院南亚热带作物研究所

2.海南省农业科学院热带果树研究所

3.华南农业大学园艺生物技术研究所

4.华南农业大学园艺学院南方果树生理研究室

关键词： 荔枝;Real-TimePCR;ufgt;优化

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2010 年 31 卷 08 期

页码： 1253-1259

收录情况： CSCD

摘要： 以不同发育阶段的‘糯米糍’荔枝果皮和成熟时不同色泽表型的‘糯米糍’(红色)、‘乌皮荔’(紫色)和‘鸭姆笼’(绿色)荔枝果皮为试材,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gapdh)基因做内标、类黄酮-3-O-葡糖基转移酶(ufgt)基因为目的基因,建立了基于SYBR Green I染料技术的Real-Time PCR检测体系,并分析ufgt基因在上述材料中的表达差异。结果表明:以cDNA为模板建立的标准曲线循环阈值(Ct)与标准cDNA模板在一定浓度范围内呈良好的线性关系,gapdh基因和ufgt基因标准曲线的相关系数分别为0.998和0.999,扩增效率分别为96.2%和95.3%,达到定量PCR分析的标准。利用该方法的分析结果表明,不同发育阶段的‘糯米糍’荔枝果皮和3个成熟时不同色泽品种荔枝果皮的ufgt基因表达有显著差异。

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