文献类型： 中文期刊

作者： 汪小福 ¹ ; 陈笑芸 ¹ ; 张小明 ² ; 周育 ¹ ; 张焕春 ³ ; 缪青梅 ¹ ; 方敬 ¹ ; 徐俊锋 ¹ ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院农产品质量标准研究所

2.浙江省农业科学院作物与核利用研究所

3.沈阳师范大学化学与生命科学学院

关键词： 分子特征;转基因;Cry1Ab;定性与定量PCR;特异性检测

期刊名称： 遗传

ISSN： 0253-9772

年卷期： 2012 年 34 卷 02 期

页码： 208-214

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 转Cry1Ab基因水稻Bt01为一种新型的转基因水稻,文章首先利用Southern blotting验证了外源基因Cry1Ab转入了Bt01中,且为单拷贝,再利用TAIL-PCR方法获得了其插入位点信息,根据获得的Bt01的5′端插入位点序列,设计了相应的定性与定量PCR检测体系的引物及探针,实验结果显示,定性PCR检测体系的最低检测极限(LOD)为10个拷贝,定量PCR检测体系的LOD为5拷贝,最低定量极限(LOQ)为10拷贝。同时为了验证建立的定量PCR体系的准确性,利用该体系检测已知转基因水稻Bt01含量分别为3%和0.5%的样品,定量结果分别为2.7%和0.47%。研究结果表明,该转化体特异性定性与定量检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因水稻Bt01的身份识别和检测提供了有效的方法。