文献类型： 中文期刊
作者： 杨亮亮 1 ; 孙效文 2 ;
作者机构： 1.上海水产大学生命科学与技术学院
2.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
关键词： 镜鲤;基因组;DNA文库
期刊名称： 上海水产大学学报
ISSN： 1004-7271
年卷期： 2004 年 13 卷 02 期
页码： 107-110
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 纯化镜鲤体组织的高分子量基因组DNA,经限制性内切酶Sau3A Ⅰ部分消化后,10％-40％蔗糖密度梯度离心分离并回收9—23kb的DNA片段。以λDASHⅡ为克隆载体,与9—23kb的DNA片段进行连接和包装,构建了镜鲤的基因组DNA文库。随机选取5个独立的噬菌斑,提取DNA后用EcoR Ⅰ与BamH Ⅰ进行酶切分析,证明克隆插入率为100％。经测定,该文库的滴度是108pfu/mL,根据公式N=ln(1-P)/In(1-f),99％的镜鲤基因组包含在该基因组文库中。以鲤IGF-Ⅱ基因探针对该基因组文库进行Southem杂交,筛选到相关的阳性克隆,证明这是一个较为完整的镜鲤基因组DNA文库。
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