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巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析

文献类型： 中文期刊

作者： 杨子平 1 ; 李辉亮 2 ; 郭冬 2 ; 彭世清 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室

关键词： 橡胶树;酵母双杂交;cDNA文库

期刊名称： 热带生物学报

ISSN： 1674-7054

年卷期： 2013 年 4 卷 04 期

页码： 303-307

摘要： 提取巴西橡胶树胶乳总RNA,并纯化mRNA。采用特异引物(oligo-dT)反转出第一链DNA,经LDPCR合成第二链DNA。将ds cDNA和经SmaⅠ线性化的pGADT7-Rec质粒共转化Y187酵母菌,构建酵母双杂交cDNA表达文库。结果表明,转化单菌落个数为2.8×107;文库滴度为4.92×107·mL-1;插入片段大小主要分布于500~2 000 bp间;重组率为96%。实验数据表明该文库能满足后续的杂交筛选。

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