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薰衣草ISSR-PCR反应体系的正交优化

文献类型： 中文期刊

作者： 苏秀娟 1 ; 刘建喜 2 ; 徐海江 3 ; 曲延英 1 ; 陈全家 1 ;

作者机构： 1.新疆农业大学农学院

2.新疆农业大学农学院新疆农业大学农业生物技术重点实验室新疆兵团种子管理总站新疆农业科学院经济作物研究所

3.新疆农业科学院经济作物研究所

关键词： 薰衣草;ISSR;正交设计;6个因素;5个水平

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2015 年 03 期

页码： 641-645

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究以19份薰衣草品种为材料,采用正交设计对ISSR-PCR反应中的5个影响因素:DNA浓度、Taq DNA聚合酶用量、Mg2+浓度、引物浓度、d NTP浓度,进行5个水平的优化试验,并在48℃~59℃范围内摸索退火温度。研究结果建立了稳定的、可重复的薰衣草ISSR最佳反应体系和PCR扩增参数。在20μL的反应体系中,DNA模板浓度为2.50 ng/μL,Mg2+浓度为2.00 mmol/L,d NTP浓度为0.20 mmol/L,引物浓度为0.40μmol/L,Taq DNA聚合酶为0.75 U,退火温度为52℃。该体系可为开展薰衣草种质资源的遗传多样性分析评价奠定基础。

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