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成团泛菌对玉米自交系PS056致病性基因fK的克隆

文献类型: 中文期刊

作者: 曹慧英 1 ; 张力群 2 ; 朱振东 3 ; 王晓鸣 4 ; 李洪杰 5 ;

作者机构: 1.中国农业科学院作物科学研究所农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程

2.中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程中国农业大学植物病理学系农业部植物病理学重点开放实验室

3.中国农业科学院作物品种资源研究所

4.中国农业科学院作物科学研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程

5.河北省农林科学院粮油作物研究所

关键词: 成团泛菌;Tn5转座子;玉米;细菌性干茎腐病;yhfK

期刊名称: 中国农业科学

ISSN: 0578-1752

年卷期: 2011 年 44 卷 02 期

页码: 299-306

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】通过克隆和鉴定成团泛菌(Pantoea agglomerans)的致病相关基因,阐明该种土壤习居细菌在玉米自交系PS056上引起细菌性干茎腐病的原因。【方法】利用转座子Tn5的随机插入突变特点,构建致病性菌株P.agglomerans XJ1突变体库;经对Tn5插入位点的侧翼扩增,确认突变体PA121的致病力相关基因;通过基因互补试验,证明yhfK与致病力的关系。【结果】通过对突变菌株的接种筛选,获得11个致病力丧失的突变体。Southern杂交和PCR扩增结果表明,Tn5在突变体PA121中为单拷贝插入,插入位点为细菌编码内膜蛋白的yhfK(Tn5插入在yhfK的1 082 bp处)。将yhfK克隆到质粒pBBR1MCS上,并导入突变体PA121中进行互补,生物测定结果显示转化子完全恢复了正常的细菌生理功能,并能够在玉米自交系PS056上恢复致病力。RT-PCR试验证明,yhfK调控hrpA的转录【。结论】成团泛菌XJ1中yhfK是调控其对植物致病性的基因之一,具有在玉米自交系PS056上引起细菌性干茎腐病的功能。

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