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双抗体夹心ELISA法测定猪α-干扰素的浓度

文献类型： 中文期刊

作者： 蒋佳颖 1 ; 王一成 2 ; 杨孝朴 1 ; 袁秀芳 2 ; 李军星 2 ; 徐丽华 2 ;

作者机构： 1.甘肃农业大学动物医学院

2.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪α-干扰素;双抗体夹心ELISA;定量检测

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2015 年 27 卷 05 期

页码： 740-745

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了能够准确测定猪血清中猪α-干扰素(Po IFN-α)含量及猪α-干扰素制品的浓度,本研究以制备并经过亲和层析提纯的兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆抗体为包被抗体,以制备的鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作为二抗,建立了测定猪α-干扰素浓度的双抗体夹心ELISA法(DAS-ELISA)。通过条件优化,最佳兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆纯化抗体包被浓度为12.5μg·m L-1,最佳鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作用浓度为6.25μg·m L-1,利用本实验室制备的已知浓度猪α-干扰素标准蛋白建立标准曲线,确定该方法检测猪α-干扰素浓度范围为0.0781~2.50μg·m L-1。与Lowry法、冻干称量法测定猪α-干扰素浓度相比较,3种方法检测结果无显著差异,但所建立的双抗体夹心ELISA法能够检测血清中猪α-干扰素浓度,且方法简便。

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