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杂交兰尿卟啉原脱羧酶基因的克隆及其表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 林榕燕 1 ; 吴建设 1 ; 林兵 1 ; 叶秀仙 1 ; 钟淮钦 1 ; 黄敏玲 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院作物研究所/福建省农业科学院花卉研究中心/福建省特色花卉工程技术研究中心

关键词: 杂交兰;UROD基因;克隆;qRT-PCR

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2020 年 009 期

页码: 1898-1905

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 尿卟啉原脱羧酶(UROD)是植物叶绿素、光敏色素和血红素合成中的一个关键酶.为了深入研究UROD基因的功能及其在杂交兰叶艺形成中的作用,本研究在转录组测序基础上,以杂交兰紫妍氏(K21)及其叶艺品系爪艺紫妍氏(K21-1)为试验材料,克隆ChUROD基因,分析其序列信息,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测该基因在不同组织及不同品种叶片中的表达情况,并对相关生理指标进行测定.结果表明,ChUROD基因编码区序列长1 191 bp,编码396个氨基酸;该蛋白质分子量约为43.78 kD,属于URO-D-CIMS-like家族蛋白;系统进化分析表明,杂交兰ChUROD与墨兰UROD的亲缘关系最近.qRT-PCR分析结果显示,ChUROD在K21叶中的相对表达量显著高于茎和根,且显著高于K21-1叶中的相对表达量.对杂交兰UROD酶浓度、尿卟啉原Ⅲ、粪卟啉原Ⅲ含量及叶绿素含量的测定结果显示,UROD酶浓度与其基因的相对表达量分布趋势相似.在K21-1中,尿卟啉原Ⅲ脱羧产生粪卟啉原Ⅲ的过程受阻,尿卟啉原Ⅲ在黄叶区叶片大量积累;叶绿素a、叶绿素b在黄叶区叶片中合成受阻,且二者含量显著低于K21和K21-1绿叶区叶片.由此可见,ChUROD基因可能在杂交兰叶艺形成中发挥重要作用.本研究结果为杂交兰ChUROD基因的功能验证和叶艺形成机制研究提供了参考依据.

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