文献类型： 中文期刊

作者： 徐道华 ¹ ; 亓希武 ² ; 陈吟 ² ; 于盱 ² ; 房海灵 ² ; 梁呈元 ³ ;

作者机构： 1.江苏省中国科学院植物研究所;江苏省农业种质资源保护与利用平台

2.;江苏省中国科学院植物研究所;江苏省农业种质资源保护与利用平台

3.;江苏省中国科学院植物研究所;江苏省农业种质资源保护与利用平台;

关键词： 金银花;LjUGT71E1;基因克隆;表达分析;原核表达

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 1409-1416

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 糖基化广泛存在于生物体中,具有非常重要的作用,而糖基转移酶则是催化糖基化反应的关键酶。本研究根据转录组数据库,设计引物从金银花(Lonicera japonica Thunb.)中克隆得到一个糖基转移酶编码基因LjUGT71E1,序列分析表明该基因的CDS为1 503 bp,理论可编码氨基酸数目为501,等电点(p I)预测为5.09,理论分子量为55 579.71 Da。多重序列比对表明LjUGT71E1与其它植物UGT71家族成员在序列上保守性很高,并且其C端具有催化植物次生代谢产物糖基化的糖基转移酶所具有的保守的PSPG-box基序。系统发生分析表明LjUGT71E1与人参(Panax ginseng)和甜叶菊(Stevia rebaudiana)的UGT71E亚家族成员聚为一支。荧光定量PCR分析表明,该基因在金银花的五个花期均有表达,在幼蕾时期相对表达量达到峰值。进一步构建了LjUGT71E1基因的原核表达载体并且在大肠杆菌中诱导表达得到重组蛋白,为后续的功能研究提供了基础。