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绵羊细菌性腹泻病多重PCR方法建立与初步应用

文献类型: 中文期刊

作者: 陈浩林 1 ; 徐景峨 1 ; 蒲龄 1 ; 余波 1 ; 王璇 1 ; 杨莉 1 ; 朱冠群 1 ; 毛凤显 1 ;

作者机构: 1.贵州省畜牧兽医研究所;贵州省畜禽遗传资源管理站

关键词: 产气荚膜梭菌;大肠杆菌;肠炎沙门氏菌;多杀性巴氏杆菌;多重PCR

期刊名称: 中国畜禽种业

ISSN: 1673-4556

年卷期: 2018 年 12 期

页码: 147-149

摘要: 根据GenBank中的羊产气荚膜梭菌(CP)α毒素基因、大肠杆菌(E.coli) K99菌毛毒力因子、肠炎沙门氏菌(SE)外膜蛋白A基因(ompA)、多杀性巴氏杆菌(Pm) K基因序列,设计了4对引物,建立了检测羊产气荚膜梭菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌和多杀性巴氏杆菌的多重PCR诊断方法,扩增产物分别为258bp、 151bp、 384bp、 585bp。敏感性、特异性结果显示,该PCR敏感性分别为羊产气荚膜梭菌6.0ng/L、大肠杆菌4.0ng/L、肠炎沙门氏菌0.4ng/L、多杀性巴氏杆菌4.0ng/L,而金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、结核杆菌等的扩增结果均为阴性。对1094份腹泻病羊粪便的检测结果表明,该多重PCR检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明,该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于绵羊细菌性腹泻病的临床检测。

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