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猪SsBHMT基因的原核表达及条件优化

文献类型: 中文期刊

作者: 余爱丽 1 ; 赵晋锋 1 ; 张晏萌 2 ; 张正 1 ; 郭二虎 1 ;

作者机构: 1.山西省农业科学院谷子研究所

2.河北农业大学生命科学学院

关键词: 原核表达;BHMT基因;条件优化

期刊名称: 生物技术进展

ISSN: 2095-2341

年卷期: 2015 年 02 期

页码: 132-136

摘要: 甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)是一种甲基代谢酶,催化甜菜碱转甲基到高半胱氨酸生成甲硫氨酸。对含有p ET30a-Ss BHMT重组质粒的菌株进行诱导表达分析,通过对菌株、IPTG诱导浓度、时间等诱导表达条件进行优化,结果表明:该目的蛋白主要以包涵体的形式出现;经过条件优化,目的蛋白表达量在上清和沉淀中均有所增加,但仍主要以包涵体的形式存在;大肠杆菌菌株ER2566为适合目的蛋白表达的菌株;在37℃,IPTG浓度为0.4 mmol/L,诱导时间为10 h的条件下,目的蛋白表达量最多。研究结果为进一步蛋白纯化与抗体制备奠定了基础。

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