文献类型： 中文期刊

作者： 凌博 ¹ ; 陈丽青 ² ; 王宇 ³ ; 杨诺 ¹ ; 范丽霞 ¹ ; 郭桂英 ⁴ ; 李雪松 ¹ ; 曾纪锋 ² ; 李迁 ⁵ ; 郑继平 ¹ ;

作者机构： 1.海南大学生命科学学院

2.海南大学动物科技学院

3.上海市农业科学院生物技术研究所

4.海南大学理学院

5.海南大学网络与技术中心

关键词： pSETsac B;kdp E基因;基因敲除

期刊名称： 热带生物学报

ISSN： 1674-7054

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 452-459

摘要： 为构建一种新型基因敲除质粒，以pSET4s和pK18mobsac B质粒为基础，通过PCR和酶切连接的方法，构建了新质粒pSETsac B，然后以pK18mobsac B质粒为对照，评价新建质粒对达卡气单胞菌kdp E基因的有痕敲除（带有四环素筛选标记）和无痕敲除效率。结果表明，两种质粒在有痕敲除效率上无差别，但在无痕敲除上，pSETsac B的敲除效率显著高于对照质粒pK18mobsac B。由于p SETsac B为穿梭性温敏质粒，因此，该质粒可望在革兰氏阳性和阴性菌的遗传机制研究中皆可发挥作用，本研究同时也为检视kdp E基因在达卡气单胞菌中的功能提供了前期的突变体材料。