文献类型： 中文期刊

作者： 周新宇 ¹ ; 陈鑫鑫 ² ; 乔松林 ² ; 郭振华 ² ; 李睿 ² ; 邓瑞广 ² ; 张改平 ¹ ;

作者机构： 1.河南农业大学动物医学院

2.河南省农业科学院

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;JXA1-R疫苗株;HNhx毒株;TaqMan荧光定量PCR;SYBR GreenⅠ荧光定量PCR;鉴别检测

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2021 年 001 期

页码： 142-151

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为鉴别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株,根据类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株非结构蛋白2（Nsp2）基因序列差异,设计特异性引物和探针,建立TaqMan荧光定量PCR和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。结果显示,2种方法中,标准品在10³～10⁸拷贝/μL均具有良好线性关系,标准曲线R²值均在0.990以上;基于TaqMan探针法的荧光定量PCR方法,JXA1-R株、HNhx株的最低检出量分别为10⁴、10³拷贝/μL,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的最低检出量均为100拷贝/μL;重复性分析结果显示,批内和批间试验的变异系数均小于1.5%,呈现出良好重复性。综上,成功建立了鉴别检测类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株的方法,且稳定性好、特异性强,可以为PRRSV的鉴别检测提供技术支持。