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巴西橡胶树顺式异戊烯基转移酶基因cDNA克隆及其序列特征分析

文献类型： 中文期刊

作者： 罗明武 1 ; 邓柳红 2 ; 易小平 2 ; 曾会才 2 ; 肖苏生 2 ;

作者机构： 1.海南大学材料与化工学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 巴西橡胶树;抑制消减杂交法;胶乳;cis-异戊烯基转移酶

期刊名称： 热带亚热带植物学报

ISSN： 1005-3395

年卷期： 2009 年 17 卷 03 期

页码： 17-22

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)胶乳的RNA为Tester;叶片RNA为Driver,利用抑制消减杂交法(suppressive subtractive hybridization,SSH)构建了一个胶乳特异表达基因差减文库。通过反式Northern点杂交(reverse Northern dot blots)筛选到一个与顺式异戊烯基转移酶基因(橡胶生物合成的关键酶基因)高度同源的阳性克隆R363。采用RACE方法获得该克隆的全长cDNA(GenBank登陆号:AY461414)。序列分析表明,该基因长1156 bp,含有873 bp的阅读框,编码290个氨基酸,分子量约为32.9 kD,等电点为7.2,含有N-端跨膜螺旋区。同源性分析表明R363编码的蛋白质具有异戊烯基转移酶家族的特征,含有cis-异戊烯基链转移酶的5个高度保守区,推测R363可能是一种新的顺式-异戊烯基转移酶基因。Northern blot分析显示,R363在胶乳中高度表达,在叶中不表达。乙烯处理前后表达强度一致,表明该基因表达不为乙烯所诱导。

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