文献类型： 中文期刊
作者： 成妍 1 ; 焦彦生 1 ; 乔宁 1 ; 苗如意 1 ;
作者机构： 1.山西省农业科学院蔬菜研究所
关键词： CRISPR-Cas9;PSY 1基因;番茄;基因敲除
期刊名称： 中国蔬菜
ISSN： 1000-6346
年卷期： 2018 年 11 期
页码： 32-38
收录情况： 北大核心
摘要： 基于NCBI数据库提供的番茄八氢番茄红素合成酶基因(PSY 1)全长,并根据基因序列中PAM(proto adjacent motif)的位置设计特异性sg RNA,构建CRISPR/Cas9 Level 1、Level 2载体;将设计好的载体转化农杆菌,继而转染番茄子叶,利用PCR产物测序法检测sg RNA在番茄基因组中的敲除效率。结果表明,36个转基因植株中有22个PSY 1基因目标区出现不同数目的碱基缺失、增加或互换,初步估计基因敲除效率为61%。本试验在番茄中初步建立了CRISPR/Cas9介导的基因敲除技术,该技术能够稳定的在番茄中实现基因敲除。
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