文献类型： 中文期刊

作者： 马爱霞 ¹ ; 袁洁 ² ; 丁壮 ¹ ; 宣华 ¹ ; 宋子运 ¹ ; 徐明 ¹ ;

作者机构： 1.吉林大学预防兽医学国家重点学科动物重要病原与疫病研究室

2.广东省农业科学院兽医研究所

关键词： 鹅源副粘病毒;NA-1株;M基因;F基因;HN基因;真核表达

期刊名称： 中国生物制品学杂志

ISSN： 1004-5503

年卷期： 2008 年 21 卷 02 期

页码： 90-92+98

收录情况： CSCD

摘要： 目的获得鹅源副粘病毒(GPMV)NA-1株M、F和HN基因真核表达蛋白。方法将NA-1株GPMV经SPF鸡胚增殖、纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank登录的NA-1株GPMV基因组序列,设计3对特异性引物,利用RT-PCR法,分别扩增M、F和HN基因开放阅读框(ORF),将目的基因克隆至pMD18-T-Simple载体,并进行酶切和序列测定。将目的片段克隆至pCI-neo表达载体,酶切鉴定正确的重组质粒,分别命名为pCI-M、pCI-F和pCI-HN。将重组表达质粒分别转染Vero细胞,用间接免疫荧光试验鉴定目的蛋白的表达。结果RT-PCR法分别扩增出M、F和HN基因,大小与预期一致。克隆载体及表达载体酶切及测序鉴定正确;重组真核表达质粒转染Vero细胞后,荧光显微镜下可见特异性荧光。结论利用pCI-neo真核表达载体在Vero细胞中成功表达了NA-1株GPMV M、F和HN基因,为下一步研究该病毒的出芽机制以及各结构蛋白的功能奠定了基础。