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一种简易的甘蔗叶组织PCR模板制备方法

文献类型： 中文期刊

作者： 崔学强 1 ; 张树珍 2 ; 冯翠莲 2 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

2.海南大学农学院

关键词： 甘蔗;碱裂解;中和;PCR模板;多重PCR

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2016 年 32 卷 03 期

页码： 58-62

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以转基因甘蔗叶片为材料,少量嫩叶经碱并短暂高温处理,再中和,形成裂解混合物。直接以此为模板,转基因甘蔗外源基因bar、KP4、Cry1Ac-2A-gna融合基因及内源基因Shactin基因为靶基因,PCR扩增结果稳定、准确、重复性强,完全可以达到常规CTAB法提取的DNA扩增效果。用此方法制备的模板室温下2周之内,4℃、-20℃下一个月之内结果不变。经多种外源基因PCR反应的反复验证,证实了这种方法在转基因甘蔗检测中的广泛适用性。该方法快速制备PCR模板,无需DNA提取过程,具有使用样品量少,成本低、简便、快捷等优点。

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