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番木瓜蛋氨酸亚砜还原酶B1(PaMsrB1)的真核表达及其活性检测

文献类型: 中文期刊

作者: 张列 1 ; 庹德财 2 ; 沈文涛 2 ; 周鹏 2 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.海南大学农学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院分析测试中心

关键词: PaMsrB1重组蛋白;表达纯化;抗H2O2氧化;薄层层析

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2015 年 13 卷 05 期

页码: 1067-1071

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 在生物和非生物逆境下,植物蛋氨酸亚砜还原酶B1(methionine sulfoxide reductase B1,MsrB1)具有修复叶绿体中被氧化蛋白的功能。本研究首次利用毕赤酵母真核表达系统,胞外分泌表达了番木瓜MsrB1(PaMsrB1)重组蛋白,并通过Ni2+-NTA-琼脂糖亲和层析柱获得了纯化蛋白。Western blot结果显示,在预期大小(22.7 kD)出现特异性条带,表明表达纯化的蛋白为PaMsrB1重组蛋白。通过H2O2氧化胁迫和薄层层析实验,从体内和体外证明了获得的重组PaMsrB1具有抗氧化能力和还原酶活性。研究结果可为进一步研究PaMsrB1在番木瓜叶绿体中抗氧化机制奠定了基础。

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[1]香蕉内生拮抗细菌KKWB-5的几丁质酶在大肠杆菌中的表达纯化与复性研究. 夏启玉,顾文亮,卢娟,张欣,卢雪花,王宇光. 2013

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