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尼罗罗非鱼p38MAPK基因克隆与表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 马银花 1 ; 邹芝英 1 ; 祝璟琳 1 ; 喻杰 1 ; 肖炜 1 ; 李大宇 1 ; 杨弘 1 ; 胡平各 1 ; 陈炳霖 1 ;

作者机构: 1.南京农业大学无锡渔业学院;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

关键词: ntp38MAPK;尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus);无乳链球菌(Streptococcus agalactiae);基因克隆;组织表达

期刊名称: 淡水渔业

ISSN: 1000-6907

年卷期: 2020 年 50 卷 03 期

页码: 42-49

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了探究p38MAPK与尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫功能的相关性,本实验运用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)获得尼罗罗非鱼埃及品系ntp38MAPK的cDNA全长序列,结果显示,该序列全长1 789 bp,开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)长1 086 bp,5′非编码区(Untranslated Region,UTR)长342 bp,3′UTR为361 bp。ORF编码361个氨基酸,预测分子量为41.598 kD,理论等电点为5.10。序列含有p38家族典型保守的Thr-Gly-Tyr(TGY)双磷酸化位点以及紧密相连的底物结合位点Ala-Thr-Arg-Trp(ATRW)。同源性以及系统进化树分析结果显示,尼罗罗非鱼的p38MAPK与大黄鱼(Larimichthys crocea)和鲈(Dicentrarchus labrax)的相似性最高。采用qRT-PCR的方法研究了ntp38MAPK在各组织以及无乳链球菌感染过程中的表达差异情况,结果显示,ntp38MAPK在各组织均有表达,其中在肌肉的表达量最高,心脏、肝脏、脾脏次之,头肾中的表达量最低。无乳链球菌感染过程中,脾脏、头肾中ntp38MAPK的表达量在2 h开始上调,肝脏中4 h开始上调,8 h后肝脏、脾脏和头肾中的表达量都有所下降,24~72 h趋于平稳,表明ntp38MAPK在尼罗罗非鱼抵抗链球菌侵染过程中发挥重要作用。

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