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A型牛轮状病毒SYBR Green I RT-qPCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 焦迪 1 ; 王瑞 1 ; 郝艳霞 2 ; 张晓倩 1 ; 崔强 3 ; 王海艳 3 ; 陈林军 3 ; 延涵 3 ; 罗晓平 4 ; 李军燕 4 ; 赵治国 3 ;

作者机构: 1.内蒙古农业大学兽医学院

2.锡林浩特市东乌珠穆沁旗动物疫病预防控制中心

3.呼和浩特海关技术中心

4.内蒙古自治区农牧业科学院

关键词: 牛轮状病毒;SYBR Green I荧光RT-PCR;检测方法

期刊名称: 中国动物检疫

ISSN: 1005-944X

年卷期: 2025 年 42 卷 009 期

页码: 69-76

摘要: A型牛轮状病毒(BRV-A)是引起牛腹泻的重要病原之一,对养牛业危害最大。为建立一种针对BRV-A的快速、高通量、低成本检测方法,根据BRV-A的VP6基因保守区设计特异性引物,建立了检测BRV-A的SYBR Green I RT-qPCR方法。该方法对浓度梯度为4.41×10~8~4.41×10~2 copies/μL质粒标准品的扩增Ct值与拷贝数浓度呈良好的线性关系,熔解曲线为单峰;与其他引起牛腹泻的常见病原无交叉反应,最低检测限为4.41×10~1 copies/μL,批内、批间重复性试验Ct值变异系数均低于1%;对临床粪便样品的阳性检出率高于地方标准中的PCR方法,且检测结果符合性较好。综上,本研究建立的BRV-A SYBR Green I RT-qPCR检测方法灵敏、特异、稳定,且操作简单、成本低,为临床样品的大规模BRV-A检测及其感染的早期诊断提供了技术支撑。

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