文献类型： 中文期刊

作者： 黎明 ¹ ; 欧秀元 ¹ ; 杨向东 ² ; 郭东全 ² ; 钱雪艳 ² ; 邢来君 ¹ ; 魏东盛 ¹ ; 李明春 ¹ ;

作者机构： 1.分子微生物学与技术教育部重点实验室

2.吉林省农业科学院生物技术研究中心

关键词： △8-脂肪酸脱氢酶;小眼虫藻;多不饱和脂肪酸

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2010 年 026 卷 011 期

页码： 1493-1499

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： △8途径是合成多不饱和脂肪酸的替代途径,△8-脂肪酸脱氢酶是该途径的关键酶之一.根据已报道的△8-脂肪酸脱氢酶基因设计引物,分别从小眼虫藻基因组DNA和cDNA中扩增得到该基因片段,序列分析表明:结构基因长1 266 bp,编码421个氨基酸;该基因没有内含子,比已经报道的△8-脂肪酸脱氢酶基因长6bp,并且N末端序列也有所不同.利用酿酒酵母的载体pYES2.0构建△8-脂肪酸脱氢酶表达载体pYEFD,并转化到营养缺陷型酿酒酵母菌株INVSc1中,在选择培养基中筛选得到酿酒酵母转化菌株YD8.YD8在合适的培养条件下,添加外源底物二十碳二烯酸和二十碳三烯酸并诱导基因表达.脂肪酸甲酯气相色谱分析表明小眼虫藻△8-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中获得了高效表达,将二十碳二烯酸和二十碳三烯酸分别转化成二高-γ-亚麻酸和二十碳四烯酸,其底物转化率分别达到了31.2%和46.3%.