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光处理下粘虫头部组织定量PCR分析中内参基因的筛选

文献类型: 中文期刊

作者: 段云 1 ; 巩中军 1 ; 吴仁海 1 ; 吴潇博 1 ; 苗进 1 ; 李彤 1 ; 蒋月丽 1 ; 武予清 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院植物保护研究所河南省农作物病虫害防治重点实验室农业部华北南部有害生物治理重点实验室

关键词: 粘虫;光处理;内参基因;qRT-PCR

期刊名称: 应用昆虫学报

ISSN:

年卷期: 2021 年 002 期

页码: 318-325

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】筛选不同光处理下粘虫Mythimna separata稳定表达的内参基因,为基因定量研究提供基础。【方法】以粘虫头部组织为材料,选取18s rRNA、EF-1α、β-actin、GAPDH和AK 5种候选内参基因进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析,然后通过ΔCt法,BestKeeper、GeNorm、Normfinder和RefFinder软件对候选内参基因的稳定性进行分析;利用GeNorm软件进行基因配对差异分析,以判断内参基因的最适组合。【结果】5种候选内参基因的Ct值都处于15-28之间。4种软件对5个候选基因稳定性的分析结果存在一定差异。综合分析各种软件的分析结果,推荐粘虫成虫不同光处理条件下采用AK和GAPDH作为内参基因。【结论】根据特定试验体系选择合适的内参基因对于qRT-PCR定量结果的准确定和可靠性具有重要意义。本研究对后续粘虫在不同光处理条件下目标基因的准确定量具有重要意义。

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