文献类型： 中文期刊
作者： 杨少华 1 ; 惠亚可 1 ; 董薇 1 ; 黄立飞 2 ; 高峰 1 ;
作者机构： 1.华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室
2.广东省农业科学院作物研究所广东省农作物遗传改良重点实验室
关键词： 紫心甘薯;转录因子;IbMYB1基因;启动子;活性检测
期刊名称： 生物技术
年卷期： 2021 年 004 期
页码： 313-320
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： [目的]获得紫心甘薯Ib MYB1基因上游启动子序列,对其进行生物信息学分析和功能验证。[方法]利用hi Tail-PCR技术克隆获得Ib MYB1基因5’端上游的一段DNA序列,命名为PIb MYB1。使用Plant CARE和PLACE在线软件对其进行生物信息学分析,并通过瞬时转化烟草叶片和稳定转化拟南芥植株进行GUS组织化学活性检测,以验证该启动子的功能。[结果]成功克隆获得了长度为2 183 bp的PIb MYB1片段,生物信息学分析结果表明该片段具有CAAT-BOX和TATA-BOX等启动子核心元件,还具有光、糖和赤霉素的响应元件以及MYB、b HLH等转录因子的结合位点。GUS组织化学活性检测结果表明,PIb MYB1（-2 183～-1 bp）和5’缺失突变体PIb MYB1F1 （-2 000～-1 bp）、PIb MYB1F2（-1 500～-1 bp）均能驱动GUS基因的表达。[结论]成功克隆获得了Ib MYB1基因的启动子序列,其驱动Ib MYB1基因表达的主要区域位于-2 183～-1 000 bp区段,该区域具有核心启动子元件、环境因子响应元件和MYB、b HLH等转录因子结合位点。
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