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香蕉MaMC6的克隆及原核表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 滕梦鑫 1 ; 徐亚 1 ; 何静 1 ; 汪奇 1 ; 乔飞 2 ; 李敬阳 2 ; 李新国 1 ;

作者机构: 1.热带作物生物育种全国重点实验室海南大学热带农林学院

2.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所

关键词: 香蕉;MaMC6;RT-qPCR;亚细胞定位;原核表达

期刊名称: 生物技术通报

ISSN:

年卷期: 2023 年 012 期

页码: 179-186

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: Metacaspases(MCs)是植物程序性细胞死亡的调控基因,参与植物对胁迫的响应。利用PCR技术,从巴西蕉(Musa AAA Cavendish cv. Brazil)细胞中克隆到MaMCs家族成员MaMC6,对其进行生物信息学分析、表达模式分析和功能验证。结果表明,MaMC6由320个氨基酸组成,为稳定蛋白,具有亲水性,不含跨膜结构,含有一个caspase-like domain,属于Ⅱ型metacaspase蛋白,具有一个防御和应激响应元件。RT-qPCR分析结果显示,100 mmol/L NaCl处理后MaMC6在2 h时相对表达量达到对照的7.70倍;盐胁迫下CaCl2处理后,基因的表达在2 h时为对照的3.99倍;而钙离子螯合剂EGTA和钙离子通道阻碍剂LaCl3的处理提高了MaMC6在盐胁迫下的表达,2 h时达到对照的9.92和11.20倍。亚细胞定位结果显示,MaMC6定位在细胞质和细胞核上。转大肠杆菌结果显示,重组菌株pET28a-MaMC6在NaCl、甘露醇和高温胁迫下生长情况优于对照菌株pET28a。综上所述,MaMC6可能参与香蕉对非生物胁迫的响应过程。本研究为进一步研究MaMCs在香蕉抗逆中的作用提供参考。

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