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羊草几丁质酶ClassⅡ基因的克隆、生物信息学分析及原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 李蕊沁 1 ; 冯树丹 1 ; 于莹 2 ; 吕召志 1 ; 黎莉 1 ; 徐明华 1 ; 尹悦佳 3 ; 郝东云 3 ;

作者机构: 1.哈尔滨师范大学

2.吉林大学

3.吉林省农业科学院

关键词: 羊草;几丁质酶;RACE技术;生物信息学;原核表达

期刊名称: 中国农业科技导报

ISSN: 1008-0864

年卷期: 2010 年 12 卷 02 期

页码: 103-110

摘要: 根据已报道的羊草几丁质酶基因的EST序列,利用RACE技术,从100mmol/L Na2CO3胁迫的羊草叶片中克隆得到羊草几丁质酶基因cDNA序列全长(GenBank登录号为GQ397277),命名为LcChi2基因。经序列测定和生物信息学分析,结果表明该序列开放阅读框为771bp,编码256个氨基酸,为Ⅱ类几丁质酶,属于19家族,分子量约为27.4kDa,预测等电点为8.67,与小麦(Triticum aestivum)、大麦(Hordeum vulgare)、黑麦(Secale cereale)和水稻(Oryza sativa)等植物的几丁质酶具有高度的同源性,序列相似性分别为96.5%、96.5%、95.2%和80.5%,推测LcChi2蛋白与其他几丁质酶执行相似的功能。在大肠杆菌中进行了原核表达,为后期植物转化的验证准备多克隆抗体。本研究所获得的信息为今后对羊草几丁质酶基因功能的进一步研究奠定了基础。

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