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少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2,3-双加氧酶基因的克隆与表达

文献类型: 中文期刊

作者: 周德平 1 ; 吴淑杭 1 ; 闵航 2 ; 姜震方 1 ;

作者机构: 1.上海市农业科学院环境科学研究所

2.浙江大学生命科学院

关键词: 菲降解;少动鞘氨醇单胞菌;儿茶酚2,3-双加氧酶基因

期刊名称: 上海农业学报

ISSN: 1000-3924

年卷期: 2007 年 23 卷 02 期

页码: 13-16

收录情况: CSCD

摘要: 应用PCR方法克隆了少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)ZX4菌株的儿茶酚2,3-双加氧酶基因(c230-ZX4)。核苷酸序列测定与分析表明,该基因片段全长924 bp且具有一个完整的阅读框,编码306个氨基酸残基。该基因与已报道的来自菌株S.yanoikuyae B1和Sphingomonas sp.KMG425的xylE基因(编码产物均为C230)具有较高的核酸序列同源性,分别为94.37%和94.05%。通过HindⅢ和XhoⅠ两个限制性酶切位点将该基因连接到质粒pET30(a)+上得到重组表达质粒pET-S3,并在E.coli BL21进行了表达,得到了42.3 kD的融合蛋白。酶活测定发现该基因工程菌株的发酵产酶活力明显高于出发菌株。

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