文献类型： 中文期刊

作者： 杜晓明 ¹ ; 张改平 ¹ ; 王丽 ² ; 郭军庆 ² ; 王林林 ¹ ; 冯华 ¹ ; 权凯 ² ; 王爱萍 ¹ ;

作者机构： 1.郑州大学生物工程系

2.河南省农业科学院

关键词： 早孕因子;原核表达;重组蛋白

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2011 年 27 卷 14 期

页码： 40-44

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 早孕因子(EPF)是具有免疫抑制和生长调节活性的妊娠相关蛋白,为目前最早确认妊娠的生化指标之一。为获得人早孕因子重组蛋白,通过PCR技术扩增人早孕因子基因,克隆入原核表达载体pGEX-6p-1,与GST基因相融合,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白的表达,通过GST树脂纯化表达蛋白。结果成功构建重组表达质粒pGEX6P-EPF,在大肠杆菌中诱导表达了GST-EPF融合蛋白,表达蛋白分子量为37.3kDa,并能被抗GST单克隆抗体特异识别,GST亲和层析纯化,制备了EPF重组蛋白。