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棉花accD基因植物表达载体的构建与遗传转化的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 张煜星 1 ; 崔燕 2 ; 祝建波 1 ; 周鹏 3 ;

作者机构: 1.石河子大学生命科学学院

2.新疆石河子大学生命科学学院

3.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

关键词: 陆地棉;拟南芥;accD基因

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2009 年 25 卷 18 期

页码: 36-40

收录情况: 北大核心

摘要: 乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)催化脂肪酸合成的第一步,是脂肪酸合成的限速酶。采用PCR方法分别从陆地棉和拟南芥基因组中扩增出ACCase羧基转移酶β-CT亚基编码基因accD,ACCase羧基转移酶α-CT亚基编码基因CAC3的定位于叶绿体的转运肽序列。将CAC3基因转运肽序列与accD基因进行体外重组,构建融合植物表达载体pBI-CAC3tp-accD。重组质粒通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101。渗透法转化拟南芥,收种子,在含卡那霉素的MS培养基中发芽筛选。用叶盘法转化烟草,经不定芽诱导、生根培养,获转基因烟草植株。T1代转基因拟南芥和转基因烟草植株经卡那霉素检测、PCR、RT-PCR检测后,初步表明目的基因已在植株中转化成功,并可以正常转录。

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