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花生AhPLDα基因植物过表达载体构建及对拟南芥的遗传转化

文献类型： 中文期刊

作者： 刘义杰 1 ; 陈四龙 1 ; 程增书 1 ; 王瑾 1 ; 宋亚辉 1 ; 郝军会 1 ; 张朋娟 1 ; 李玉荣 1 ;

作者机构： 1.河北省农林科学院粮油作物研究所河北省作物遗传育种实验室

关键词： 花生;AhPLDα基因;植物表达载体;转基因;干旱胁迫信号

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2016 年 31 卷 06 期

页码： 31-38

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了明确花生AhPLDα基因在响应干旱胁迫信号传导中的功能和作用机制,以ABA处理的冀花4号花生叶片c DNA为模板,用RT-PCR方法扩增AhPLDα1和AhPLDα2的全长CDS片段,采用酶切-连接的方法分别将这2个基因定向克隆到植物表达载体p Bar-F3上,冻融法将重组子转入根癌农杆菌GV3101,利用改良Floral-dip法将过表达质粒转入拟南芥。菌落PCR和酶切结果表明,Ca MV35S启动子驱动的过表达载体重组质粒p Bar-AhPLDα构建正确。通过RT-PCR和qRT-PCR验证,表明AhPLDα1和AhPLDα2基因整合到拟南芥基因组中并能过量表达,获得了阳性转基因纯合株系。干旱胁迫试验表明,转基因植株的耐旱性较野生型明显增强。可见,AhPLDα基因参与了干旱胁迫应答过程,是转基因途径提高作物耐旱性的潜在候选基因。

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