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柑桔黄龙病菌外膜蛋白的原核表达与纯化

文献类型： 中文期刊

作者： 程保平 1 ; 鹿连明 2 ; 彭埃天 1 ; 赵弘巍 3 ; 宋晓兵 1 ; 陈霞 1 ;

作者机构： 1.广东省农科院植物保护研究所

2.浙江省农科院果树研究所

3.南京农业大学植物保护学院

关键词： 柑桔黄龙病菌;omp基因;原核表达;蛋白纯化

期刊名称： 广东农业科学

ISSN： 1004-874X

年卷期： 2014 年 41 卷 10 期

页码： 132-134+145

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得大量高纯度的柑桔黄龙病菌Omp外膜重组蛋白,应用PCR方法从染病柑桔模板中扩增出黄龙病菌omp基因的3个片段,将其克隆到pMDl9-T载体,再亚克隆到pET32a原核表达载体,构建pET32a-omp原核表达重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导并用SDS-PAGE电泳检测带组氨酸标签的Omp融合蛋白表达后,用镍柱分离纯化该融合蛋白。结果表明:柑桔黄龙病菌omp基因序列的两个片段在37℃经1 mmol/L IPTG诱导后,在大肠杆菌得到了高效表达;镍柱纯化蛋白得到预期大小(约55 ku)的融合蛋白。

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