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对虾肝胰腺细小病毒滚环扩增检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 王勤涛 1 ; 张庆利 1 ; 杨昊霖 1 ; 刘天齐 1 ; 刘笋 1 ; 杨冰 1 ; 黄倢 1 ;

作者机构： 1.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛

关键词： 对虾;肝胰腺细小病毒;检测;滚环扩增

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 1000-7075

年卷期： 2014 年 35 卷 04 期

页码： 61-67

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据对虾肝胰腺细小病毒(HPV)保守基因序列,设计特异性的锁式探针及其扩增引物,优化反应条件,建立了肝胰腺细小病毒超分支滚环扩增检测方法。实验中采用一步法连接,探针在Taq DNA连接酶作用下,58℃连接40 min、62℃扩增30 min便可以扩增出明显条带。反应特异性验证实验表明,该体系能够特异性地检测出HPV,而不与供试的其他对虾病原发生交叉反应;灵敏度分析结果显示该方法的检测极限为105 copies/μl,与PCR检测方法相比,一步法连接的滚环扩增的灵敏度低两个数量级。该方法反应过程中温度变化次数少,基本都在等温条件下进行,不需要PCR仪,可发展成为在简便实验条件下使用的简易检测方法。

  • 相关文献

[1]肝胰腺细小病毒(HPV)PCR检测及流行情况调查. 刘天齐,杨冰,刘笋,万晓媛,王秀华,黄倢. 2014

[2]同时检测两种对虾病毒和4种弧菌的同步PCR方法的建立. 许拉,黄使,戈蕾,杨冰. 2008

[3]1993~1994年山东省中国对虾育苗期病毒感染的流行病学调查. 黄,于佳,宋晓玲,孔杰,杨丛海. 1995

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[8]我国一株新型黄头病毒的分子流行病学. 朱罗罗,张庆利,万晓媛,邱亮,马芳,黄倢. 2016

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[17]对虾病害防治药物对浮游植物的影响研究. 刘萍,李健,孙修涛,刘得月. 1997

[18]对虾单养和对虾-罗非鱼混养试验围隔水质动态及产出效果的对比. 虞为,李卓佳,王丽花,张晓阳,曹煜成,文国樑,朱长波,马广智. 2013

[19]江蓠对虾混养效果的研究. 张汉华,梁超愉,吴进锋,陈锤. 2005

[20]养殖对虾新品种培育技术研究进展. 高冬梅,李健,王清印. 2002

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