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转基因甘蔗植株Southern杂交体系的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 崔学强 1 ; 张树珍 2 ; 沈林波 2 ; 冯翠莲 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 甘蔗;Southern杂交;地高辛;PCR法标记探针;酶切

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2015 年 31 卷 12 期

页码： 105-109

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 对甘蔗Southern杂交体系的优化,旨为转基因甘蔗Southern杂交鉴定分析提供参考。以转基因甘蔗为材料,就探针不同标记方法的比较、甘蔗基因组DNA的提取、基因组DNA酶切量、酶切时间及杂交过程等方面,对地高辛标记的Southern杂交技术进行了优化研究。结果表明,改良的CTAB法提取的甘蔗DNA能满足后期实验的要求;PCR法标记探针的效率较随机引物法标记探针的效率高,更适合用于Southern杂交;40μg的DNA在400μL酶切体系中,酶切10 h可获得良好的酶切效果;杂交温度40℃,杂交18 h,可获得清晰的杂交条带。

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