文献类型： 中文期刊

作者： 任琴 ¹ ; 王亚军 ¹ ; 郭志鸿 ¹ ; 李继平 ² ; 谢忠奎 ¹ ; 王若愚 ¹ ; 王立 ² ; 惠娜娜 ² ;

作者机构： 1.中国科学院寒区旱区环境与工程研究所

2.甘肃省农业科学院

关键词： 植物介导的RNAi;马铃薯;致病疫霉;基因沉默

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2015 年 41 卷 06 期

页码： 881-888

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 由致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的晚疫病是最具毁灭性的马铃薯病害。为明确植物介导的RNAi沉默致病疫霉基因的有效性,本研究采用重叠延伸PCR技术克隆同时与晚疫病菌4个ces基因均同源的融合基因C1234,构建内含子连接的C1234反向重复序列植物表达载体,采用农杆菌介导法转化晚疫病易感马铃薯品种大西洋,经PCR和Southern杂交检测,获得129个转基因株系。离体叶片接种病原菌后,有97个转基因株系发病速度明显慢于野生型,接种6 d后病斑大小和霉层厚度均明显小于对照,并且叶片感病部位没有出现失绿斑,而野生型产生了明显的失绿斑。实时定量RT-PCR分析发现,发病延缓的叶片上致病疫霉4个纤维素合酶基因的表达水平明显低于野生型。本研究表明,转基因植株中产生的以晚疫病菌ces基因为靶标的ds RNA能够沉默致病疫霉相应基因表达,延缓发病进程。