文献类型： 中文期刊
作者： 王步高 1 ; 曾德年 1 ; 覃宗华 2 ; 余劲术 2 ; 吴彩艳 2 ; 吕敏娜 2 ; 蔡建平 2 ;
作者机构： 1.湖南农业大学动物医学院
2.广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医卫生公共实验室
关键词： 鸡;B淋巴细胞激活因子(BAFF);基因克隆;表达
期刊名称： 广东畜牧兽医科技
ISSN： 1005-8567
年卷期： 2007 年 32 卷 03 期
页码： 29-32
摘要： 根据GenBank中收录的鸡B淋巴细胞激活因子(chicken B cell activator factor,ChBAFF)基因序列,设计特异引物,以3周龄鸡法氏囊总RNA为模板,经RT-PCR扩增出ChBAFF的ORF序列,测序后,插入质粒pMAL-c2X,构建重组表达载体,转染到大肠杆菌Rosset(DE3),并以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25/,融合蛋白的分子量约为75ku,所表达重组蛋白主要存在于菌体裂解物上清液中,为可溶性表达。以淀粉树脂柱亲和层析纯化重组蛋白后进行SDS-PAGE,用BandScan软件分析,提纯重组蛋白的含量可达97.5/。MTT比色法分析证明,纯化的重组蛋白可显著刺激鸡脾脏淋巴细胞的活化。
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