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鸭疫里默氏杆菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 万春和 1 ; 程龙飞 2 ; 邵周伍林 1 ; 刘思国 1 ; 黄瑜 2 ; 张云 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

关键词: 鸭疫里默氏杆菌;铁依赖抑制子基因;TaqMan探针;荧光定量PCR

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2014 年 36 卷 06 期

页码: 458-461

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestife,RA)定量检测方法,本研究根据RA的铁依赖抑制子基因(RaDtxR)序列,设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针检测RA的荧光定量PCR方法。该方法检测RA RaDtxR在4.27×102拷贝/μL~4.27×106拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,其扩增相关系数为0.998,扩增效率为99%,最低检测下限为4.27×102拷贝/μL。对常见RA血清型(1型、2型、3型和10型)检测结果均为阳性;而对大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、Ⅰ型鸭肝炎病毒、禽坦布苏病毒和鸭圆环病毒等常见鸭群病原检测均为阴性。该方法重复性好,组内和组间变异系数分别为0.23%~0.77%和0.93%~1.32%。该方法的建立为RA感染宿主靶器官的感染程度和定量分析奠定基础。

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