文献类型： 中文期刊

作者： 傅秋玲 ¹ ; 万春和 ¹ ; 焦文龙 ¹ ; 韩相敏 ² ; 程龙飞 ¹ ; 陈珍 ¹ ; 赖志 ² ; 陈红梅 ¹ ; 梁齐章 ¹ ; 江南松 ¹ ; 刘荣昌 ¹ ; 施少华 ¹ ; 陈翠腾 ¹ ; 苏敬良 ³ ; 黄瑜 ¹ ; 傅光华 ¹ ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省禽病防治重点实验室/福建省畜禽疫病防控产业技术创新研究院

2.上海创宏生物科技有限公司

3.中国农业大学动物医学院

关键词： 鸭3型甲肝病毒;野毒株;弱毒疫苗株;聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法;鉴别

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2025 年 47 卷 007 期

页码： 691-696

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种能快速、简便、准确鉴别检测我国鸭3型甲肝病毒（DHAV-3）野毒株与弱毒活疫苗HB80株的方法，本研究根据DHAV-3野毒株及HB80株的2A基因序列差异片段设计并合成一对特异性引物，经反应条件的优化，初步建立了鉴别检测我国DHAV-3野毒株与HB80株的反转录聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（RTPCR-RFLP）方法。利用该方法检测DHAV-3野毒株和疫苗株，以及DHAV-1、鸭3型星状病毒、H9亚型禽流感病毒、禽坦布苏病毒、鸭瘟病毒、鸭3型腺病毒、鸭呼肠孤病毒和番鸭细小病毒，结果显示该方法仅能特异性扩增DHAV-3（包括野毒株和疫苗株）的682 bp片段，且仅DHAV-3野毒株的RT-PCR产物（682 bp片段）能够被Apa I酶切为444 bp和238 bp两个片段。将DHAV-3的RNA 10倍倍比稀释（1.7×10～6拷贝/μL～1.7×10～1拷贝/μL）后作为模板，利用该方法检测，结果显示该方法能够检出DHAV-3 RNA的最低浓度为170拷贝/μL。重复性结果显示，该方法对3个不同浓度DHAV-3野毒株和HB80株RNA的检测结果均一致。利用该方法和常规RT-PCR方法同时对疑似临床鸭肝炎组织、实验感染DHAV-3野毒株（HB株）和免疫DHAV-3活疫苗株鸭组织等101份样品检测，结果显示两者检测结果的符合率为100%。本研究首次建立了能特异性鉴别检测DHAV-3野毒株与我国弱毒活疫苗株的RT-PCR-RFLP方法，为我国鸭DHAV-3感染的防控提供了技术支撑。