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大黄鱼寄生性盾纤毛虫PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 池洪树 1 ; 柯翎 1 ; 林能锋 1 ; 方勤美 1 ; 陈永聪 1 ; 施少华 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院生物技术研究所

关键词: 大黄鱼;盾纤毛虫;PCR检测;核糖体小亚基基因

期刊名称: 海洋渔业

ISSN: 1004-2490

年卷期: 2025 年 47 卷 004 期

页码: 517-523

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 盾纤毛虫病是目前大黄鱼(Larimichthys crocea)苗期的主要病害之一,可引起巨大的经济损失.为建立快速高效的寄生性盾纤毛虫分子检测方法,根据盾纤毛虫18S rRNA基因可变区设计了1对引物,经优化建立了盾纤毛虫的PCR检测方法;并对灵敏度、特异性和检测效果进行了验证.结果显示,采用该方法以贪食迈阿密虫(Miamiensis avidus)、水滴伪康纤虫(Pseudoconchocelis globularis)、海洋尾丝虫(Uronema marina)、中华后阿脑虫(Metanophrys sinensis)、弗州拟尾丝虫(Parauronema floridense)、显赫针口虫(Eminentia aciclata)等盾纤毛虫样品DNA为模板均扩增出特异性条带,而以刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)、淀粉卵甲藻(Amyloodinium ocellatum)、变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)等病原DNA和健康大黄鱼的DNA为模板时无相应扩增条带;该方法检测的极限值为6.56×104 copies,具有较高的灵敏性.应用该方法从10份病鱼样品检测出5份盾纤毛虫阳性样品,较常规显微镜检查结果(4份)更为准确、敏感.研究建立了一种快速、识别性高、灵敏的盾纤毛虫的PCR检测方法,可为大黄鱼盾纤毛虫病的流行病学调查和早期快速诊断提供技术支持.

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