文献类型: 中文期刊
作者: 张利国 1 ; 张效霏 2 ; 常缨 1 ; 宋宪友 3 ; 房郁妍 3 ; 郑楠 3 ;
作者机构: 1.东北农业大学生命科学学院
2.广西大学数学与信息科学学院
3.黑龙江省农业科学院经济作物研究所
关键词: 大麻;ISSR;反应体系;优化
期刊名称: 中国农学通报
ISSN: 1000-6850
年卷期: 2014 年 30 卷 12 期
页码: 105-109
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为探寻出更适宜大麻的ISSR反应体系,用以研究大麻的遗传多样性,利用梯度试验对dNTP、TaqDNA聚合酶和引物的浓度,预变性时间和退火温度5个因素进行优化,从而建立了适合大麻的ISSR-PCR反应体系。结果表明,在25μL体系中,dNTP 200μmol/L,模板1 ng/μL,引物200 nmol/L,聚合酶1 U(2.5 pmol/μL);预变性3 min(94℃),退火温度48℃,为大麻最佳反应体系;研究利用优化后的ISSR反应体系,在30条引物中,筛选出8条适合大麻的ISSR引物,体系具有较好的稳定性和重复性。
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