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应用流式细胞术检测虾类血细胞总数方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 冼健安 1 ; 张秀霞 1 ; 郭慧 2 ; 钱坤 2 ; 王安利 2 ; 王冬梅 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

2.华南师范大学生命科学学院

关键词： 血细胞总数;流式细胞术;虾类;镉;血细胞

期刊名称： 水生态学杂志

ISSN： 1674-3075

年卷期： 2015 年 36 卷 03 期

页码： 89-94

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过对流式细胞术(FCM)检测虾类血细胞总数(THC)的条件和方法进行优化,为虾类血细胞学研究提供快捷、准确的测定方法。2012年7-9月,应用SYBR Green I作为荧光染料标记完整血细胞,设置3个不同染料浓度(1×、10×和100×),测定不同孵育时间下染色细胞比例的变化。结果显示,染料终浓度为10×时染色效果最佳,其最佳孵育时间为60 min;应用建立的FCM方法和显微计数方法测定10尾凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的THC,平均值分别为(16.68±1.57)×106个/m L和(15.09±1.76)×106个/m L,2种方法测定结果的相关性极显著(R2=0.8064,P<0.01)。凡纳滨对虾经不同浓度(0.5 mg/L和5.0 mg/L)的Cd2+胁迫,利用建立的FCM方法测定Cd2+胁迫下对虾THC的变化。结果显示,0.5 mg/L和5.0 mg/L Cd2+胁迫下,对虾THC随着胁迫时间的延长不断下降,胁迫48 h时分别下降至对照组的78.7%和64.7%,可见Cd2+胁迫对虾类血细胞产生毒性,抑制了血细胞活性,表明该方法适用于虾类的血细胞学研究。

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