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长穗偃麦草EeSKOR启动子的克隆及功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 张勇 1 ; 田小霞 1 ; 郑明利 1 ; 毛培春 1 ; 孟林 1 ;

作者机构: 1.北京市农林科学院草业花卉与景观生态研究所

关键词: 启动子;EeSKOR;长穗偃麦草;GUS染色;非生物胁迫

期刊名称: 西北植物学报

ISSN: 1000-4025

年卷期: 2021 年 011 期

页码: 1810-1817

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了研究外整流钾通道蛋白(stelar K+ outward rectifier channels, SKOR)基因SKOR在长穗偃麦草中的功能,利用热不对称交错PCR(Tail-PCR)技术,克隆了长穗偃麦草EeSKOR启动子,并进行启动子顺式作用元件及基因表达分析。结果表明:(1)成功获得长穗偃麦草EeSKOR基因起始密码子上游798 bp启动子序列,命名为pEeSKOR。(2)EeSKOR启动子除必须具备的核心启动元件外,还含有特异转录因子结合位点、植物激素响应元件、光响应元件、组织特异的启动元件和胁迫响应元件。(3)成功构建植物表达载体pEeSKOR∷GUS,经农杆菌介导的瞬时转化,EeSKOR启动子驱动GUS报告基因可在拟南芥的叶、叶柄和根中表达。(4)实时定量PCR检测显示,在NaCl、PEG、ABA和SA处理下长穗偃麦草EeSKOR基因在根中呈现不同的表达模式,NaCl处理下EeSKOR的表达量呈先下调后上调趋势;PEG处理下EeSKOR的表达量呈上调趋势,且随着时间的延长显著上调;ABA处理下EeSKOR的表达受到抑制且随处理时间延长呈显著下调趋势;SA处理下EeSKOR表现出先上调后下调趋势,且在处理72 h时表达量显著低于正常表达水平。研究认为,EeSKOR基因的表达受NaCl、PEG、ABA和SA的诱导调节。该研究结果为进一步系统研究长穗偃麦草EeSKOR基因功能提供重要理论依据。

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