文献类型： 中文期刊

作者： 师志海 ¹ ; 王文佳 ² ; 兰亚莉 ¹ ; 张彬 ¹ ; 孟红丽 ¹ ; 王亚州 ¹ ; 滑留帅 ¹ ; 徐照学 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所

2.河南牧业经济学院动物医药学院

关键词： 牛诺如病毒;实时荧光定量PCR;犊牛腹泻;检测

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2020 年 51 卷 007 期

页码： 1728-1736

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法.根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法.该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×102~2.24×108拷贝·μL-1线性关系良好,相关系数R2=0.997,扩增效率为98.44%;该方法可特异性检出BNoV,对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性;最低检测限为22.4拷贝·μL-1;批间和批内的变异系数均小于2%,重复性好.对2017年9月—2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31%(25/221),采样场阳性率为92.86%(13/14).本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段.